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La manipulación precisa de líquidos es fundamental para obtener resultados analíticos fiables. Al preparar calibradores, dispensar reactivos para PCR o diluir muestras para la determinación de viscosidad, pequeñas inexactitudes en el volumen dispensado pueden propagarse a lo largo de todo el análisis. Conclusión errónea, pérdida de muestras y falta de cumplimiento normativo son consecuencias de una mala manipulación de líquidos. La buena noticia es que una manipulación adecuada de líquidos se puede lograr mediante estrategias sencillas. A continuación se presentan consejos para alcanzar una manipulación superior de líquidos en su laboratorio.
1. Seleccione la pipeta y la punta adecuadas
El primer paso para una buena manipulación de líquidos consiste en utilizar el instrumento adecuado para el volumen deseado. Usar una pipeta de 1000 µL para un alícuota de 10 µL no garantiza una manipulación precisa de líquidos, ya que dicho volumen está muy lejos del rango de calibración del instrumento. Regla práctica: opere su pipeta entre el 35 % y el 100 % de su volumen nominal. Para volúmenes inferiores a 1 µL, utilice pipetas de desplazamiento positivo o sistemas automatizados de manipulación de líquidos.
Elegir la punta adecuada es tan importante como elegir la pipeta adecuada. Las puntas estándar no siempre forman un sellado correcto con todas las pipetas, lo que provocará fugas de aire y errores de volumen. Asegúrese de utilizar puntas recomendadas por el fabricante de la pipeta o certificadas para su uso con su pipeta. Las puntas con filtro pueden ayudar a prevenir la contaminación por aerosoles, pero aumentan la retención de muestra en la punta; solo deben usarse cuando sea necesario. Las puntas de baja retención son ideales para líquidos viscosos, ya que reducen la tendencia del líquido a adherirse a la pared de la punta, y para disolventes volátiles garantizan la saturación de la punta. La humectación previa —aspirando y dispensando el disolvente dos o tres veces antes de la aspiración— saturará el aire dentro de la punta y reducirá las pérdidas por evaporación con disolventes volátiles.
2. Controlar los factores ambientales
De los factores ambientales que afectan la manipulación de líquidos, la temperatura es primordial. Los líquidos se expanden y contraen con los cambios de temperatura, y las pipetas están calibradas a temperatura ambiente —comúnmente entre 20 y 25 °C—. Una diferencia significativa entre la temperatura del laboratorio y la temperatura de la muestra o del reactivo provocará inexactitudes en la entrega del volumen. Asegúrese siempre de que sus muestras y reactivos estén a temperatura ambiente antes de comenzar a pipetear. Se recomiendan estaciones de trabajo o baños con control de temperatura para ensayos sensibles a la temperatura.
La humedad también es importante. Una humedad baja puede provocar pérdidas evaporativas rápidas con disolventes volátiles; una reducción del volumen dispensado. Niveles altos de humedad pueden causar la condensación de humedad dentro de la pipeta, afectando la precisión del desplazamiento de aire. Asegúrese de trabajar de forma eficiente con disolventes volátiles y considere el uso de pipetas de desplazamiento positivo o dispensadores automatizados con movimiento reducido de aire para este tipo de disolventes. Las corrientes de aire provenientes de ventanas abiertas, rejillas de ventilación y la actividad dentro del laboratorio pueden afectar sus resultados al generar un enfriamiento irregular de la punta de la pipeta o de la muestra líquida.
3. Utilice la técnica adecuada de pipeteo
Incluso la pipeta más precisamente calibrada es inútil si se utiliza de forma incorrecta. Desarrolle una técnica consistente. Humedezca previamente la punta aspirando y dispensando el líquido de tres a cinco veces antes de la aspiración para la transferencia, con el fin de aumentar la humedad dentro de la pipeta y reducir las pérdidas por evaporación. Coloque la punta de la pipeta a 2-4 mm por debajo de la superficie para volúmenes micrométricos o a 4-6 mm por debajo de la superficie para volúmenes mayores durante la aspiración. Evite sumergir la punta demasiado profundamente, ya que esto hará que se adhiera exceso de líquido al exterior de la punta.
Presione lentamente y de forma constante el émbolo para aspirar el líquido. Evite soltar rápidamente el émbolo, ya que esto podría provocar salpicaduras o burbujas de aire; al soltarlo lentamente, la muestra se introduce en el cuerpo de la pipeta. Espere un segundo tras la aspiración para permitir que el volumen completo entre en la punta. Durante la dispensación, coloque la punta formando un ángulo de 30 a 45 grados contra la pared del recipiente receptor. Presione el émbolo hasta el primer tope, espere un segundo y luego presiónelo hasta el segundo tope para lograr la entrega total del líquido. Considere utilizar la pipetación inversa para mejorar la precisión con volúmenes muy pequeños o muestras muy viscosas.
4. Automatice siempre que sea posible
La variabilidad del operador inherente a la pipetación manual —diferencias en la técnica, fatiga o incluso distracción— puede contribuir a inconsistencias en sus resultados. Los dispensadores automáticos de líquidos entregan exactamente el mismo volumen cada vez. Una vez programado un método, un dispensador automático lo replicará miles de veces sin variación alguna, independientemente de quién inicie la ejecución.
Los dispensadores automatizados son especialmente adecuados para mantener una profundidad constante de inmersión de la pipeta y una velocidad constante de aspiración y dispensación; ambos factores clave para lograr volúmenes reproducibles en la manipulación de líquidos. Las diluciones en serie resultan particularmente adecuadas para la automatización, lo que reduce las posibilidades de errores manuales durante estos procesos largos y repetitivos. Los dispensadores automatizados y los manipuladores de líquidos fabricados por Hangzhou Zhongwang Technology son excelentes opciones para garantizar una alta precisión y reproducibilidad en laboratorios de control de calidad y en cualquier entorno donde el volumen preciso de líquido pueda tener un impacto significativo en los resultados.
RESUMEN
Una buena manipulación de líquidos se logra mediante la selección cuidadosa de pipetas y puntas, el control de factores ambientales, el uso de buenas técnicas y la automatización cuando resulta beneficiosa. Cada componente contribuye a minimizar la incertidumbre de la medición y a maximizar la fiabilidad de los resultados obtenidos en su laboratorio. Hangzhou Zhongwang Technology Co., Ltd. se complace en ofrecer dispensadores automáticos, manipuladores de líquidos, viscosímetros, equipos de calentamiento y agitación, baños fríos, hornos para calcinación, tecnología al vacío, tubos capilares para viscosímetros y consumibles. Póngase en contacto con nosotros hoy mismo para conocer lo que podemos hacer por usted.