Точная работа с жидкостями является ключевым фактором получения надёжных аналитических результатов. При приготовлении калибраторов, дозировании реагентов для ПЦР или разведении образцов для определения вязкости даже незначительные погрешности объёма дозируемой жидкости могут повлиять на весь ход анализа. Неправильные выводы, потраченные впустую образцы и несоответствие требованиям — всё это последствия некачественной работы с жидкостями. Хорошая новость заключается в том, что высокая точность работы с жидкостями достижима с помощью простых стратегий. Ниже приведены рекомендации по обеспечению превосходной работы с жидкостями в вашей лаборатории.
1. Выберите правильную комбинацию пипетки и наконечника
Первый шаг к качественной работе с жидкостями — использование подходящего инструмента для заданного объёма. Использование пипетки на 1000 мкл для отбора аликвоты объёмом 10 мкл не обеспечит точности, поскольку этот объём значительно выходит за пределы её калибровочного диапазона. Эмпирическое правило: используйте пипетку в диапазоне от 35 до 100 % её номинального объёма. Для объёмов менее 1 мкл применяйте пипетки с положительным вытеснением или автоматизированные дозаторы жидкостей.
Выбор правильного наконечника столь же важен, как и выбор правильного пипетатора. Стандартные наконечники не всегда обеспечивают надёжное уплотнение со всеми пипетаторами, что приводит к утечке воздуха и ошибкам объёма. Убедитесь, что вы используете наконечники, рекомендованные производителем пипетатора, или сертифицированные для использования с вашим пипетатором. Фильтровые наконечники помогают предотвратить аэрозольное загрязнение, но увеличивают задержку образца в наконечнике; их следует применять только при необходимости. Наконечники с низкой задержкой лучше всего подходят для вязких жидкостей, поскольку они снижают тенденцию жидкости прилипать к стенкам наконечника, а также для летучих растворителей — для обеспечения насыщения наконечника. Предварительное увлажнение путём многократного (2–3 раза) набора и выпуска растворителя перед основным отбором пробы насыщает воздух внутри наконечника и снижает потери за счёт испарения при работе с летучими растворителями.
2. Контроль факторов окружающей среды
Среди факторов окружающей среды, влияющих на работу с жидкостями, наиболее важным является температура. Объём жидкостей увеличивается или уменьшается при изменении температуры, а пипетки калибруются при комнатной температуре — обычно при 20–25 °C. Значительное различие между температурой в лаборатории и температурой образца или реагента приведёт к неточностям при дозировании объёма. Всегда убедитесь, что ваши образцы и реагенты находятся при комнатной температуре перед началом работы с пипетками. Для анализов, чувствительных к температуре, рекомендуется использовать рабочее место или баню с регулируемой температурой.
Влажность также имеет важное значение. Низкая влажность может привести к быстрой потере летучих растворителей за счёт испарения и, как следствие, к уменьшению объёма дозируемой жидкости. Высокий уровень влажности может вызвать конденсацию влаги внутри пипетки, что повлияет на точность воздушного вытеснения. Работайте эффективно с летучими растворителями и рассмотрите возможность использования пипеток с положительным вытеснением или автоматических дозаторов с минимальным перемещением воздуха при работе с такими растворителями. Сквозняки от открытых окон, вентиляционных решёток и движение в лаборатории могут повлиять на результаты измерений, вызывая неравномерное охлаждение наконечника пипетки или образца жидкости.
3. Используйте правильную технику пипетирования
Даже самый точно откалиброванный пипетатор бесполезен при неправильном использовании. Разработайте последовательную технику работы. Предварительно увлажните наконечник, аспирируя и диспенсируя жидкость три–пять раз перед аспирацией для переноса — это повысит влажность внутри пипетки и снизит потери за счёт испарения. При аспирации располагайте наконечник пипетки на глубине 2–4 мм под поверхностью жидкости при работе с микротомами или на глубине 4–6 мм при работе с большими объёмами. Избегайте чрезмерного погружения наконечника, поскольку это приведёт к избыточному смачиванию его внешней поверхности жидкостью.
Медленно и плавно нажмите на поршень, чтобы набрать жидкость. Избегайте резкого отпускания поршня — это может вызвать брызги или образование воздушных пузырьков; медленное отпускание обеспечивает полное поступление образца в ствол пипетки. После набора сделайте паузу на одну секунду, чтобы весь объём полностью вошёл в наконечник. При дозировании располагайте наконечник под углом 30–45 градусов к стенке приёмного сосуда. Нажмите поршень до первого упора, сделайте паузу на одну секунду, затем нажмите до второго упора для полной выдачи жидкости. Для повышения точности при работе с очень малыми объёмами или высоковязкими образцами рассмотрите возможность использования обратной пипетировки.
4. Автоматизируйте там, где это возможно
Операторская вариабельность, присущая ручной пипетировке — различия в технике, усталость или даже отвлечённость — может усиливать нестабильность результатов. Автоматические дозаторы жидкости обеспечивают точную доставку заданного объёма каждый раз. После программирования метода автоматический дозатор будет воспроизводить его тысячи раз без каких-либо отклонений, независимо от того, кто запускает процесс.
Автоматические дозаторы особенно хорошо поддерживают постоянную глубину погружения пипетки, а также скорость аспирации и дозирования — оба этих параметра являются ключевыми для воспроизводимости объёмов жидкости. Серийные разведения особенно подходят для автоматизации, поскольку это снижает вероятность ручных ошибок при выполнении длительных и повторяющихся операций. Автоматические дозаторы и жидкостные дозаторы, произведённые компанией Hangzhou Zhongwang Technology, являются отличным выбором для обеспечения высокой точности и воспроизводимости в лабораториях контроля качества и в любой среде, где точный объём жидкости может существенно повлиять на результаты.
РЕЗЮМЕ
Хорошее обращение с жидкостями достигается тщательным подбором пипеток и наконечников, контролем факторов окружающей среды, применением правильной техники и автоматизацией там, где это целесообразно. Каждый из этих компонентов способствует минимизации неопределённости измерений и повышению надёжности получаемых в вашей лаборатории результатов. Компания Hangzhou Zhongwang Technology Co., Ltd. рада предложить автоматические дозаторы, жидкостные обработчики, вискозиметры, оборудование для нагрева и перемешивания, холодильные бани, зольные печи, вакуумное оборудование, капиллярные вискозиметрические трубки и расходные материалы. Свяжитесь с нами уже сегодня, чтобы узнать, чем мы можем вам помочь.