Como melhorar a precisão no manuseio de líquidos em laboratórios

A manipulação precisa de líquidos é fundamental para obter resultados analíticos confiáveis. Ao preparar calibradores, dispensar reagentes para PCR ou diluir amostras para determinação de viscosidade, pequenas imprecisões no volume dispensado podem ser transmitidas a toda a análise. Conclusões incorretas, perda de amostras e não conformidade resultam de uma má manipulação de líquidos. A boa notícia é que uma boa manipulação de líquidos pode ser alcançada por meio de estratégias simples. A seguir, apresentamos dicas para obter uma manipulação superior de líquidos em seu laboratório.

1. Selecione a pipeta e a ponta adequadas

O primeiro passo para uma boa manipulação de líquidos é usar o instrumento certo para o volume desejado. Usar uma pipeta de 1000 µL para um alíquota de 10 µL não resultará em uma manipulação precisa de líquidos, pois está muito distante da sua faixa de calibração. Regra prática: opere sua pipeta entre 35% e 100% do seu volume nominal. Use pipetas de deslocamento positivo ou sistemas automatizados de manipulação de líquidos para volumes inferiores a 1 µL.

Escolher a ponta certa é tão importante quanto escolher a pipeta certa. As pontas padrão nem sempre formam um vedação adequada com todas as pipetas, o que pode causar vazamento de ar e erros de volume. Certifique-se de usar pontas recomendadas pelo fabricante da pipeta ou certificadas para uso com sua pipeta. Pontas com filtro podem ajudar a prevenir contaminação por aerossóis, mas aumentam a retenção da amostra na ponta; devem ser usadas apenas quando necessário. Pontas de baixa retenção são ideais para líquidos viscosos, pois reduzem a tendência do líquido de aderir à parede da ponta, e para solventes voláteis garantem a saturação da ponta. A pré-umidificação — aspirando e dispensando o solvente duas ou três vezes antes da aspiração final — saturará o ar dentro da ponta e reduzirá as perdas por evaporação em solventes voláteis.

2. Controlar os fatores ambientais

Dos fatores ambientais que afetam a manipulação de líquidos, a temperatura é primordial. Os líquidos expandem-se e contraem-se com as variações de temperatura, e as pipetas são calibradas à temperatura ambiente — mais comumente entre 20 e 25 °C. Uma diferença significativa entre a temperatura do laboratório e a temperatura da amostra ou do reagente resultará em imprecisões na entrega de volume. Certifique-se sempre de que suas amostras e reagentes estejam à temperatura ambiente antes de iniciar a pipetagem. Recomenda-se o uso de estações de trabalho ou banhos com controle de temperatura para ensaios sensíveis à temperatura.

A humidade também é importante. Uma baixa humidade pode provocar perdas evaporativas rápidas com solventes voláteis, reduzindo o volume dispensado. Níveis elevados de humidade podem causar condensação de humidade no interior da pipeta, afetando a precisão do deslocamento de ar. Certifique-se de trabalhar de forma eficiente com solventes voláteis e considere utilizar pipetas de deslocamento positivo ou dispensadores automáticos com movimento reduzido de ar para este tipo de solventes. Correntes de ar provenientes de janelas abertas, saídas de ar condicionado e atividade no laboratório podem influenciar os seus resultados ao provocar um arrefecimento desigual da ponta da pipeta ou da amostra líquida.

3. Utilize uma técnica adequada de pipetagem

Até a pipeta mais precisamente calibrada é inútil se utilizada de forma inadequada. Desenvolva uma técnica consistente. Umecte previamente a ponta aspirando e dispensando o líquido três a cinco vezes antes da aspiração para a transferência, a fim de aumentar a umidade no interior da pipeta e reduzir perdas por evaporação. Posicione a ponta da pipeta a 2–4 mm abaixo da superfície para volumes micrométricos ou a 4–6 mm abaixo da superfície para volumes maiores durante a aspiração. Evite submergir a ponta muito profundamente, pois isso fará com que excesso de líquido adira à superfície externa da ponta.

Pressione lentamente e com firmeza o êmbolo para aspirar o líquido. Evite soltar rapidamente o êmbolo, pois isso pode causar salpicos ou bolhas de ar; soltá-lo lentamente permite que a amostra seja totalmente aspirada para o interior do corpo da pipeta. Aguarde um segundo após a aspiração para garantir que todo o volume desejado entre na ponta. Posicione a ponta formando um ângulo de 30 a 45 graus contra a parede do recipiente receptor durante a dispensação. Empurre o êmbolo até o primeiro ponto de parada, aguarde um segundo e, em seguida, pressione até o segundo ponto de parada para dispensar todo o líquido. Considere utilizar a técnica de pipetagem reversa para melhorar a precisão ao manipular volumes muito pequenos ou amostras altamente viscosas.

4. Automatize sempre que possível

A variabilidade inerente à pipetagem manual — diferenças de técnica, fadiga ou até mesmo distração do operador — pode contribuir para inconsistências nos seus resultados. Os sistemas automatizados de manipulação de líquidos dispensam exatamente o mesmo volume a cada vez. Uma vez programado um método, o sistema automatizado o replicará milhares de vezes sem qualquer variação, independentemente de quem inicie a execução.

Os dispensadores automatizados são especialmente eficazes na manutenção de uma profundidade constante de imersão da pipeta e de velocidades consistentes de aspiração e dispensação; ambos são fatores-chave para volumes reprodutíveis de manipulação de líquidos. As diluições em série são particularmente adequadas à automação, reduzindo as chances de erros manuais durante esses processos demorados e repetitivos. Os dispensadores automatizados e os manipuladores de líquidos fabricados pela Hangzhou Zhongwang Technology são excelentes opções para garantir alta precisão e reprodutibilidade em laboratórios de controle de qualidade e em qualquer ambiente onde o volume preciso de líquido possa ter um impacto significativo nos resultados.

Resumo

Um bom manuseio de líquidos é alcançado por meio da seleção cuidadosa de pipetas e ponteiras, do controle de fatores ambientais, da utilização de boas técnicas e da automação, sempre que benéfica. Cada componente contribui para minimizar a incerteza da medição e maximizar a confiabilidade dos resultados obtidos em seu laboratório. A Hangzhou Zhongwang Technology Co., Ltd. tem o prazer de fornecer dispensadores automatizados, manipuladores de líquidos, viscosímetros, equipamentos de aquecimento e agitação, banhos frios, fornos de calcinação, tecnologia a vácuo, tubos capilares para viscosímetros e consumíveis. Entre em contato conosco hoje para saber o que podemos fazer por você.